Departamento de Medicina Laboratorial, Hospital Popular da Região Autônoma de Guangxi Zhuang, Nanning, China
Departamento de Medicina Laboratorial, Hospital Afiliado da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Shandong, Jinan
Huang Huayi, Escola de Medicina Laboratorial, Youjiang National Medical University, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, Nova Jersey, 07430, EUA.
Departamento de Medicina Laboratorial, Hospital Popular da Região Autônoma de Guangxi Zhuang, Nanning, China
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Huang Huayi, Escola de Medicina Laboratorial, Youjiang National Medical University, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, Nova Jersey, 07430, EUA.
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A fim de compreender melhor as alterações patológicas do COVID-19, é propício para o manejo clínico da doença e preparação para a onda de pandemias semelhantes no futuro.
Os parâmetros hematológicos de 52 pacientes com COVID-19 internados em hospitais designados foram analisados retrospectivamente.Os dados foram analisados por meio do software estatístico SPSS.
Antes do tratamento, os subconjuntos de células T, linfócitos totais, largura de distribuição de glóbulos vermelhos (RDW), eosinófilos e basófilos foram significativamente menores do que após o tratamento, enquanto os indicadores de inflamação de neutrófilos, neutrófilos e linfócitos A razão (NLR) e proteína C β-reativa ( CRP), bem como glóbulos vermelhos (RBC) e hemoglobina diminuíram significativamente após o tratamento.Os subconjuntos de células T, linfócitos totais e basófilos de pacientes graves e críticos foram significativamente menores do que os de pacientes moderados.Neutrófilos, NLR, eosinófilos, procalcitonina (PCT) e PCR são significativamente maiores em pacientes graves e críticos do que em pacientes moderados.Os CD3+, CD8+, linfócitos totais, plaquetas e basófilos de pacientes com mais de 50 anos são menores do que aqueles com menos de 50 anos, enquanto neutrófilos, NLR, PCR, RDW em pacientes com mais de 50 anos são maiores do que aqueles com menos de 50 anos.Em pacientes graves e críticos, existe uma correlação positiva entre o tempo de protrombina (TP), alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST).
Subconjuntos de células T, contagem de linfócitos, RDW, neutrófilos, eosinófilos, NLR, PCR, PT, ALT e AST são indicadores importantes no manejo, especialmente para pacientes graves e criticamente doentes com COVID-19.
A pandemia da doença de coronavírus de 2019 (COVID-19) causada por um novo tipo de coronavírus eclodiu em dezembro de 2019 e se espalhou rapidamente pelo mundo.1-3 No início do surto, o foco clínico era nas manifestações e epidemiologia, combinado com tomografia computadorizada para imagem dos pacientes 4 e 5, e então diagnosticado com resultados positivos de amplificação de nucleotídeos.No entanto, várias lesões patológicas foram encontradas posteriormente em diferentes órgãos.6-9 Cada vez mais evidências mostram que as alterações fisiopatológicas do COVID-19 são mais complicadas.O ataque do vírus causa danos a vários órgãos e o sistema imunológico reage exageradamente.Foram observados aumentos nas citocinas séricas e alveolares e proteínas da resposta inflamatória7, 10-12, e linfopenia e subgrupos anormais de células T foram encontrados em pacientes criticamente enfermos.13, 14 É relatado que a proporção de neutrófilos para linfócitos tornou-se um indicador útil para distinguir nódulos tireoidianos malignos e benignos na prática clínica.15 A RNL também pode ajudar a distinguir pacientes com colite ulcerativa de controles saudáveis.16 Também desempenha um papel na tireoidite e está associada ao diabetes tipo 2.17, 18 RDW é um marcador de eritrocitose.Estudos descobriram que ajuda a distinguir nódulos da tireoide, diagnosticar artrite reumatóide, doença do disco lombar e tireoidite.19-21 A PCR é um preditor universal de inflamação e tem sido estudada em muitos casos.22 Recentemente foi descoberto que NLR, RDW e CRP também estão envolvidos na COVID-19 e desempenham um papel importante no diagnóstico e prognóstico da doença.11, 14, 23-25 Portanto, os resultados dos exames laboratoriais são importantes para avaliar a condição do paciente e tomar decisões de tratamento.Analisamos retrospectivamente os parâmetros laboratoriais de 52 pacientes com COVID-19 que foram hospitalizados em hospitais designados no sul da China de acordo com seu pré e pós-tratamento, gravidade e idade, para entender melhor as alterações patológicas da doença e ajudar no manejo clínico futuro de COVID-19.
Este estudo realizou uma análise retrospectiva de 52 pacientes com COVID-19 internados no hospital designado Nanning Fourth Hospital de 24 de janeiro de 2020 a 2 de março de 2020. Entre eles, 45 estavam moderadamente doentes e 5 gravemente doentes.Por exemplo, a idade varia de 3 meses a 85 anos.Quanto ao sexo, havia 27 homens e 25 mulheres.O paciente apresenta sintomas como febre, tosse seca, fadiga, dor de cabeça, falta de ar, congestão nasal, coriza, dor de garganta, dores musculares, diarreia e mialgia.A tomografia computadorizada mostrou que os pulmões eram irregulares ou em vidro fosco, indicando pneumonia.Diagnosticar de acordo com a 7ª edição das Diretrizes chinesas de diagnóstico e tratamento da COVID-19.Confirmado pela detecção de qPCR em tempo real de nucleotídeos virais.De acordo com os critérios diagnósticos, os pacientes foram divididos em grupos moderados, graves e críticos.Em casos moderados, o paciente desenvolve febre e síndrome respiratória, e os achados de imagem mostram padrões de pneumonia.Se o paciente atender a qualquer um dos seguintes critérios, o diagnóstico é grave: (a) desconforto respiratório (frequência respiratória ≥30 respirações/min);(b) saturação de oxigênio no sangue do dedo em repouso ≤93%;(c) pressão arterial de oxigênio (PO2) )/fração inspiratória O2 (Fi O2) ≤300 mmHg (1 mmHg = 0,133 kPa).Se o paciente preencher qualquer um dos seguintes critérios, o diagnóstico é grave: (a) insuficiência respiratória que requer ventilação mecânica;(b) choque;(c) falência de outros órgãos que requeiram tratamento na unidade de terapia intensiva (UTI).De acordo com os critérios acima, 52 pacientes foram diagnosticados como gravemente doentes em 2 casos, gravemente doentes em 5 casos e moderadamente doentes em 45 casos.
Todos os pacientes, incluindo pacientes moderados, graves e críticos, são tratados de acordo com os seguintes procedimentos básicos: (a) Terapia adjuvante geral;(b) Terapia antiviral: lopinavir/ritonavir e α-interferon;(c) A dosagem da fórmula da medicina tradicional chinesa pode ser ajustada de acordo com a condição do paciente.
Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Revisão do Instituto de Pesquisa de Nanning Fourth Hospital e foi usado para coletar informações do paciente.
Análise hematológica do sangue periférico: a análise hematológica de rotina do sangue periférico é realizada no analisador hematológico Mindray BC-6900 (Mindray) e no analisador hematológico Sysmex XN 9000 (Sysmex).A amostra de sangue anticoagulante de ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) em jejum foi coletada na manhã seguinte à admissão do paciente no hospital.A avaliação da consistência entre os dois analisadores de sangue acima foi verificada de acordo com os procedimentos de controle de qualidade do laboratório.Na análise hematológica, a contagem e diferenciação de glóbulos brancos (WBC), glóbulos vermelhos (RBC) e índice são obtidos juntamente com gráficos de dispersão e histogramas.
Citometria de fluxo de subpopulações de linfócitos T: O citômetro de fluxo BD (Becton, Dickinson and Company) FACSCalibur foi usado para análise de citometria de fluxo para analisar subpopulações de células T.Analise os dados pelo software MultiSET.A medição foi realizada de acordo com os procedimentos operacionais padrão e as instruções do fabricante.Use um tubo de coleta de sangue anticoagulado com EDTA para coletar 2 ml de sangue venoso.Misture suavemente a amostra girando o tubo de amostra várias vezes para evitar a condensação.Após a coleta, a amostra é enviada ao laboratório e analisada em até 6 horas em temperatura ambiente.
Análise de imunofluorescência: A proteína C reativa (PCR) e a procalcitonina (PCT) foram analisadas imediatamente após a conclusão da análise usando amostras de sangue analisadas por hematologia e analisadas no analisador de imunofluorescência FS-112 (Wondfo Biotech Co., LTD .) em a análise.) Siga as instruções do fabricante e os padrões de procedimento do laboratório.
Analise a alanina aminotransferase sérica (ALT) e aspartato aminotransferase (AST) no analisador químico HITACHI LABOSPECT008AS (HITACHI).O tempo de protrombina (TP) foi analisado no analisador STAGO STA-R Evolution (Diagnostica Stago).
Reação em cadeia da polimerase quantitativa de transcrição reversa (RT-qPCR): Use modelos de RNA isolados de swabs nasofaríngeos ou secreções do trato respiratório inferior para realizar RT-qPCR para detectar SARS-CoV-2.Os ácidos nucleicos foram separados na plataforma de separação automática de ácidos nucleicos SSNP-2000A (Bioperfectus Technologies).O kit de detecção foi fornecido pela Sun Yat-sen University Daan Gene Co., Ltd. e Shanghai BioGerm Medical Biotechnology Co., Ltd. O ciclo térmico foi realizado em um termociclador ABI 7500 (Applied Biosystems).Os resultados dos testes de nucleosídeos virais são definidos como positivos ou negativos.
O software SPSS versão 18.0 foi utilizado para análise dos dados;teste t de amostra pareada, teste t de amostra independente ou teste U de Mann-Whitney foram aplicados, e um valor de P <0,05 foi considerado significativo.
Cinco pacientes graves e dois pacientes graves eram mais velhos do que os do grupo moderado (69,3 vs. 40,4).As informações detalhadas de 5 pacientes graves e 2 pacientes graves são mostradas nas Tabelas 1A e B. Pacientes graves e gravemente enfermos são geralmente baixos em subconjuntos de células T e contagens totais de linfócitos, mas a contagem de glóbulos brancos é aproximadamente normal, exceto para pacientes com glóbulos brancos elevados (11,5 × 109/L).Os neutrófilos e monócitos também são geralmente elevados.Os valores séricos de PCT, ALT, AST e PT de 2 pacientes críticos e 1 paciente crítico foram elevados, e os valores de PT, ALT, AST de 1 paciente crítico e 2 pacientes críticos foram positivamente correlacionados.Quase todos os 7 pacientes apresentaram níveis elevados de PCR.Eosinófilos (EOS) e basófilos (BASO) tendem a ser baixos em pacientes criticamente enfermos (Tabela 1A e B).A Tabela 1 lista a descrição da faixa normal de parâmetros hematológicos na população adulta chinesa.
A análise estatística mostrou que antes do tratamento, células T CD3+, CD4+, CD8+, linfócitos totais, largura de distribuição de RBC (RDW), eosinófilos e basófilos foram significativamente menores do que após o tratamento (P = 0,000,. 000, 0,000, 0,012, . 04, 0,000 e 0,001).Os indicadores inflamatórios neutrófilos, razão neutrófilos/linfócitos (NLR) e PCR antes do tratamento foram significativamente maiores do que após o tratamento (P = 0,004, 0,011 e 0,017, respectivamente).Hb e RBC diminuíram significativamente após o tratamento (P = 0,032, 0,026).PLT aumentou após o tratamento, mas não foi significativo (P = 0,183) (Tabela 2).
Os subconjuntos de células T (CD3+, CD4+, CD8+), linfócitos totais e basófilos de pacientes graves e críticos foram significativamente menores do que os de pacientes moderados (P = 0,025, 0,048, 0,027, 0,006 e 0,046).Os níveis de neutrófilos, NLR, PCT e PCR em pacientes graves e criticamente doentes foram significativamente maiores do que aqueles em pacientes moderados (P = 0,005, 0,002, 0,049 e 0,002, respectivamente).Pacientes graves e criticamente doentes apresentaram PLT menor do que pacientes moderados;entretanto, a diferença não foi estatisticamente significativa (Tabela 3).
Os CD3+, CD8+, linfócitos totais, plaquetas e basófilos de pacientes com mais de 50 anos foram significativamente menores do que os de pacientes com menos de 50 anos (P = 0,049, 0,018, 0,019, 0,010 e 0,039, respectivamente), enquanto aqueles com mais de 50 anos 50 anos Os neutrófilos dos pacientes, razão NLR, níveis de PCR e RDW foram significativamente maiores do que os dos pacientes com menos de 50 anos de idade (P = 0,0191, 0,015, 0,009 e 0,010, respectivamente) (Tabela 4).
O COVID-19 é causado pela infecção pelo coronavírus SARS-CoV-2, que apareceu pela primeira vez em Wuhan, China, em dezembro de 2019. O surto de SARS-CoV-2 se espalhou rapidamente e levou a uma pandemia global.1-3 Devido ao conhecimento limitado da epidemiologia e patologia do vírus, a taxa de mortalidade no início do surto é alta.Embora não existam medicamentos antivirais, o gerenciamento de acompanhamento e o tratamento do COVID-19 foram muito aprimorados.Isso é especialmente verdadeiro na China, quando as terapias adjuvantes são combinadas com a medicina tradicional chinesa para tratar casos precoces e moderados.26 pacientes com COVID-19 se beneficiaram de uma melhor compreensão das alterações patológicas e dos parâmetros laboratoriais da doença.doença.Desde então, a taxa de mortalidade diminuiu.Neste relato, não houve óbitos entre os 52 casos analisados, incluindo 7 pacientes graves e críticos (Tabela 1A e B).
Observações clínicas descobriram que a maioria dos pacientes com COVID-19 apresenta redução de linfócitos e subpopulações de células T, que estão relacionadas à gravidade da doença.13, 27 Neste relatório, verificou-se que células T CD3+, CD4+, CD8+, linfócitos totais, RDW antes do tratamento, eosinófilos e basófilos foram significativamente menores do que após o tratamento (P = 0,000, 0,000, 0,000, 0,012, 0,04, 0,000 e 0,001).Nossos resultados são semelhantes aos relatórios anteriores.Esses relatórios têm significado clínico no monitoramento da gravidade do COVID-19.8, 13, 23-25, 27, enquanto os indicadores inflamatórios neutrófilos, relação neutrófilos/linfócitos (NLR ) e PCR após pré-tratamento do que tratamento (P = 0,004, . 011 e .017, respectivamente), que foram observados e relatados anteriormente em pacientes com COVID-19.Portanto, esses parâmetros são considerados indicadores úteis para o tratamento da COVID-19.8.Após o tratamento, 11 hemoglobina e glóbulos vermelhos foram significativamente reduzidos (P = 0,032, 0,026), indicando que o paciente teve anemia durante o tratamento.Um aumento no PLT foi observado após o tratamento, mas não foi significativo (P = 0,183) (Tabela 2).Acredita-se que a diminuição de linfócitos e subpopulações de células T esteja relacionada à depleção celular e apoptose quando se acumulam em locais inflamatórios que combatem o vírus.Ou podem ter sido consumidos pela secreção excessiva de citocinas e proteínas inflamatórias.8, 14, 27-30 Se os subgrupos de linfócitos e células T forem persistentemente baixos e a razão CD4+/CD8+ for alta, o prognóstico é ruim.29 Em nossa observação, linfócitos e subgrupos de células T se recuperaram após o tratamento e todos os 52 casos foram curados (Tabela 1).Níveis elevados de neutrófilos, NLR e PCR foram observados antes do tratamento e diminuíram significativamente após o tratamento (P = 0,004, 0,011 e 0,017, respectivamente) (Tabela 2).A função de subconjuntos de células T na infecção e na resposta imune foi relatada anteriormente.29, 31-34
Como o número de pacientes graves e críticos é muito pequeno, não realizamos análise estatística dos parâmetros entre pacientes graves e graves e pacientes moderados.Os subconjuntos de células T (CD3+, CD4+, CD8+) e linfócitos totais de pacientes graves e críticos são significativamente menores do que os de pacientes moderados.Os níveis de neutrófilos, NLR, PCT e PCR em pacientes graves e críticos foram significativamente maiores do que aqueles em pacientes moderados (P = 0,005, 0,002, 0,049 e 0,002, respectivamente) (Tabela 3).As alterações nos parâmetros laboratoriais estão relacionadas à gravidade do COVID-19.35.36 A causa da basofilia não é clara;isso pode ser devido ao consumo de alimentos durante o combate ao vírus no local da infecção semelhante aos linfócitos.35 O estudo descobriu que pacientes com COVID-19 grave também tinham eosinófilos reduzidos;14 No entanto, nossos dados não mostraram que esse fenômeno pode ser devido ao pequeno número de casos graves e críticos observados no estudo.
Curiosamente, descobrimos que em pacientes graves e críticos, há uma correlação positiva entre os valores de PT, ALT e AST, indicando que houve lesão de múltiplos órgãos no ataque do vírus, como mencionado em outras observações.37 Portanto, eles podem ser novos parâmetros úteis para avaliar a resposta e o prognóstico do tratamento com COVID-19.
Análises posteriores mostraram que os CD3+, CD8+, linfócitos totais, plaquetas e basófilos de pacientes com mais de 50 anos foram significativamente menores do que os de pacientes com menos de 50 anos (P = P = 0,049, 0,018, 0,019, 0,010 e. 039, respectivamente), enquanto os níveis de neutrófilos, NLR, CRP e RBC RDW em pacientes com mais de 50 anos de idade foram significativamente maiores do que os de pacientes com menos de 50 anos de idade (P = 0,0191, 0,015, 0,009 e 0,010 , respectivamente) (Tabela 4) .Esses resultados são semelhantes aos relatórios anteriores.14, 28, 29, 38-41 A diminuição das subpopulações de células T e as altas taxas de células T CD4+/CD8+ estão relacionadas à gravidade da doença;os casos de idosos tendem a ser mais graves;portanto, mais linfócitos serão consumidos na resposta imune ou seriamente danificados.Da mesma forma, um RDW de RBC mais alto indica que esses pacientes desenvolveram anemia.
Nossos resultados de pesquisa confirmam ainda que os parâmetros hematológicos são de grande importância para melhor compreensão das alterações clínico-patológicas dos pacientes com COVID-19 e para melhorar a orientação do tratamento e prognóstico.
Liang Juanying e Nong Shaoyun coletaram dados e informações clínicas;Jiang Liejun e Chi Xiaowei realizaram a análise dos dados;Dewu Bi, Jun Cao, Lida Mo e Xiaolu Luo realizaram análises de rotina;Huang Huayi foi responsável pela concepção e escrita.
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Horário da postagem: 22 de julho de 2021